ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಹೇಗೆ ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಬೇಕೆಂದು ಈ ಲೇಖನವು ನಿಮಗೆ ಕಲಿಸುತ್ತದೆ

ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿಯು ಕಚ್ಚಾ ವಸ್ತುಗಳು, ಮಧ್ಯವರ್ತಿಗಳು, ಸಿದ್ಧತೆಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ಯಾಕೇಜಿಂಗ್ ವಸ್ತುಗಳಲ್ಲಿನ ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಘಟಕ ಮತ್ತು ಕಲ್ಮಶಗಳ ವಿಷಯವನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸುವ ಮುಖ್ಯ ವಿಧಾನವಾಗಿದೆ, ಆದರೆ ಅನೇಕ ವಸ್ತುಗಳು ಅವಲಂಬಿಸಲು ಪ್ರಮಾಣಿತ ವಿಧಾನಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿಲ್ಲ, ಆದ್ದರಿಂದ ಹೊಸ ವಿಧಾನಗಳನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸುವುದು ಅನಿವಾರ್ಯವಾಗಿದೆ. ದ್ರವ ಹಂತದ ವಿಧಾನಗಳ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಯಲ್ಲಿ, ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ಕಾಲಮ್ ದ್ರವ ವರ್ಣರೇಖನದ ತಿರುಳಾಗಿದೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ಸೂಕ್ತವಾದ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಹೇಗೆ ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡುವುದು ನಿರ್ಣಾಯಕವಾಗಿದೆ. ಈ ಲೇಖನದಲ್ಲಿ, ಲೇಖಕರು ಮೂರು ಅಂಶಗಳಿಂದ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಹೇಗೆ ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಬೇಕೆಂದು ವಿವರಿಸುತ್ತಾರೆ: ಒಟ್ಟಾರೆ ವಿಚಾರಗಳು, ಪರಿಗಣನೆಗಳು ಮತ್ತು ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್ ವ್ಯಾಪ್ತಿ.

A.ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಕಾಲಮ್‌ಗಳನ್ನು ಆಯ್ಕೆಮಾಡಲು ಒಟ್ಟಾರೆ ಕಲ್ಪನೆಗಳು

1. ವಿಶ್ಲೇಷಕದ ಭೌತಿಕ ಮತ್ತು ರಾಸಾಯನಿಕ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಿ: ರಾಸಾಯನಿಕ ರಚನೆ, ಕರಗುವಿಕೆ, ಸ್ಥಿರತೆ (ಉದಾಹರಣೆಗೆ ಇದು ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಣ/ಕಡಿಮೆ/ಜಲವಿಚ್ಛೇದನ ಮಾಡುವುದು ಸುಲಭವಾಗಿದೆಯೇ), ಆಮ್ಲತೆ ಮತ್ತು ಕ್ಷಾರೀಯತೆ, ಇತ್ಯಾದಿ, ವಿಶೇಷವಾಗಿ ರಾಸಾಯನಿಕ ರಚನೆಯು ಪ್ರಮುಖವಾಗಿದೆ. ಸಂಯೋಜಿತ ಗುಂಪಿನಂತಹ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸುವ ಅಂಶವು ಬಲವಾದ ನೇರಳಾತೀತ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಬಲವಾದ ಪ್ರತಿದೀಪಕವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ;

2. ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಉದ್ದೇಶವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಿ: ಹೆಚ್ಚಿನ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆ, ಹೆಚ್ಚಿನ ಕಾಲಮ್ ದಕ್ಷತೆ, ಸಣ್ಣ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ಸಮಯ, ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಂವೇದನೆ, ಹೆಚ್ಚಿನ ಒತ್ತಡದ ಪ್ರತಿರೋಧ, ದೀರ್ಘ ಕಾಲಮ್ ಜೀವನ, ಕಡಿಮೆ ವೆಚ್ಚ, ಇತ್ಯಾದಿಗಳ ಅಗತ್ಯವಿದೆಯೇ;

1. ಸೂಕ್ತವಾದ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೊಗ್ರಾಫಿಕ್ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಆರಿಸಿ: ಕಣದ ಗಾತ್ರ, ರಂಧ್ರದ ಗಾತ್ರ, ತಾಪಮಾನ ಸಹಿಷ್ಣುತೆ, pH ಸಹಿಷ್ಣುತೆ, ವಿಶ್ಲೇಷಕದ ಹೊರಹೀರುವಿಕೆ ಇತ್ಯಾದಿಗಳಂತಹ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೊಗ್ರಾಫಿಕ್ ಫಿಲ್ಲರ್‌ನ ಸಂಯೋಜನೆ, ಭೌತಿಕ ಮತ್ತು ರಾಸಾಯನಿಕ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಅರ್ಥಮಾಡಿಕೊಳ್ಳಿ.

1. ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಕಾಲಮ್‌ಗಳನ್ನು ಆಯ್ಕೆಮಾಡಲು ಪರಿಗಣನೆಗಳು

ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಕಾಲಮ್‌ನ ಭೌತಿಕ ಮತ್ತು ರಾಸಾಯನಿಕ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳ ದೃಷ್ಟಿಕೋನದಿಂದ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಆಯ್ಕೆಮಾಡುವಾಗ ಪರಿಗಣಿಸಬೇಕಾದ ಅಂಶಗಳನ್ನು ಈ ಅಧ್ಯಾಯವು ಚರ್ಚಿಸುತ್ತದೆ. 2.1 ಫಿಲ್ಲರ್ ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್

2.1.1 ಸಿಲಿಕಾ ಜೆಲ್ ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್ ಹೆಚ್ಚಿನ ದ್ರವ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಕಾಲಮ್‌ಗಳ ಫಿಲ್ಲರ್ ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್ ಸಿಲಿಕಾ ಜೆಲ್ ಆಗಿದೆ. ಈ ರೀತಿಯ ಫಿಲ್ಲರ್ ಹೆಚ್ಚಿನ ಶುದ್ಧತೆ, ಕಡಿಮೆ ವೆಚ್ಚ, ಹೆಚ್ಚಿನ ಯಾಂತ್ರಿಕ ಬಲವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ ಮತ್ತು ಗುಂಪುಗಳನ್ನು ಮಾರ್ಪಡಿಸಲು ಸುಲಭವಾಗಿದೆ (ಉದಾಹರಣೆಗೆ ಫೀನೈಲ್ ಬಂಧ, ಅಮಿನೋ ಬಾಂಡಿಂಗ್, ಸೈನೋ ಬಾಂಡಿಂಗ್, ಇತ್ಯಾದಿ), ಆದರೆ ಇದು ಸಹಿಸಿಕೊಳ್ಳುವ pH ಮೌಲ್ಯ ಮತ್ತು ತಾಪಮಾನದ ವ್ಯಾಪ್ತಿಯು ಸೀಮಿತವಾಗಿದೆ: ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಿಲಿಕಾ ಜೆಲ್ ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್ ಫಿಲ್ಲರ್‌ಗಳ pH ಶ್ರೇಣಿಯು 2 ರಿಂದ 8 ರಷ್ಟಿದೆ, ಆದರೆ ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಮಾರ್ಪಡಿಸಿದ ಸಿಲಿಕಾ ಜೆಲ್ ಬಂಧಿತ ಹಂತಗಳ pH ಶ್ರೇಣಿಯು 1.5 ರಿಂದ 10 ರವರೆಗೆ ಅಗಲವಾಗಿರುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಮಾರ್ಪಡಿಸಿದ ಸಿಲಿಕಾ ಜೆಲ್ ಬಂಧಿತ ಹಂತಗಳು ಕಡಿಮೆ pH ನಲ್ಲಿ ಸ್ಥಿರವಾಗಿರುತ್ತವೆ, ಉದಾಹರಣೆಗೆ ಎಜಿಲೆಂಟ್ ಜೋರ್ಬಾಕ್ಸ್ ಆರ್‌ಆರ್‌ಎಚ್‌ಡಿ ಸ್ಟೇಬಲ್‌ಬಾಂಡ್-ಸಿ18, ಇದು pH 1 ರಿಂದ 8 ವರೆಗೆ ಸ್ಥಿರವಾಗಿರುತ್ತದೆ; ಸಿಲಿಕಾ ಜೆಲ್ ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್‌ನ ಮೇಲಿನ ತಾಪಮಾನದ ಮಿತಿಯು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ 60 ℃, ಮತ್ತು ಕೆಲವು ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಕಾಲಮ್‌ಗಳು ಹೆಚ್ಚಿನ pH ನಲ್ಲಿ 40 ℃ ತಾಪಮಾನವನ್ನು ಸಹಿಸಿಕೊಳ್ಳಬಲ್ಲವು.

2.1.2 ಪಾಲಿಮರ್ ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್ ಪಾಲಿಮರ್ ಫಿಲ್ಲರ್‌ಗಳು ಹೆಚ್ಚಾಗಿ ಪಾಲಿಸ್ಟೈರೀನ್-ಡಿವಿನೈಲ್ಬೆಂಜೀನ್ ಅಥವಾ ಪಾಲಿಮೆಥಾಕ್ರಿಲೇಟ್ ಆಗಿರುತ್ತವೆ. ಅವುಗಳ ಅನುಕೂಲಗಳು ಅವರು ವ್ಯಾಪಕವಾದ pH ಶ್ರೇಣಿಯನ್ನು ಸಹಿಸಿಕೊಳ್ಳಬಲ್ಲವು - ಅವುಗಳನ್ನು 1 ರಿಂದ 14 ರ ವ್ಯಾಪ್ತಿಯಲ್ಲಿ ಬಳಸಬಹುದು, ಮತ್ತು ಅವು ಹೆಚ್ಚಿನ ತಾಪಮಾನಕ್ಕೆ ಹೆಚ್ಚು ನಿರೋಧಕವಾಗಿರುತ್ತವೆ (80 ° C ಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿನದನ್ನು ತಲುಪಬಹುದು). ಸಿಲಿಕಾ-ಆಧಾರಿತ C18 ಫಿಲ್ಲರ್‌ಗಳೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ, ಈ ರೀತಿಯ ಫಿಲ್ಲರ್ ಬಲವಾದ ಹೈಡ್ರೋಫೋಬಿಸಿಟಿಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳಂತಹ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸುವಲ್ಲಿ ಮ್ಯಾಕ್ರೋಪೊರಸ್ ಪಾಲಿಮರ್ ತುಂಬಾ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿದೆ. ಇದರ ಅನಾನುಕೂಲಗಳು ಕಾಲಮ್ ದಕ್ಷತೆಯು ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಸಿಲಿಕಾ ಆಧಾರಿತ ಫಿಲ್ಲರ್‌ಗಳಿಗಿಂತ ಯಾಂತ್ರಿಕ ಶಕ್ತಿ ದುರ್ಬಲವಾಗಿರುತ್ತದೆ. 2.2 ಕಣದ ಆಕಾರ

ಹೆಚ್ಚಿನ ಆಧುನಿಕ HPLC ಫಿಲ್ಲರ್‌ಗಳು ಗೋಳಾಕಾರದ ಕಣಗಳಾಗಿವೆ, ಆದರೆ ಕೆಲವೊಮ್ಮೆ ಅವು ಅನಿಯಮಿತ ಕಣಗಳಾಗಿವೆ. ಗೋಲಾಕಾರದ ಕಣಗಳು ಕಡಿಮೆ ಕಾಲಮ್ ಒತ್ತಡ, ಹೆಚ್ಚಿನ ಕಾಲಮ್ ದಕ್ಷತೆ, ಸ್ಥಿರತೆ ಮತ್ತು ದೀರ್ಘಾವಧಿಯ ಜೀವನವನ್ನು ಒದಗಿಸಬಹುದು; ಹೆಚ್ಚಿನ ಸ್ನಿಗ್ಧತೆಯ ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತಗಳನ್ನು ಬಳಸುವಾಗ (ಉದಾಹರಣೆಗೆ ಫಾಸ್ಪರಿಕ್ ಆಮ್ಲ) ಅಥವಾ ಮಾದರಿಯ ದ್ರಾವಣವು ಸ್ನಿಗ್ಧತೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುವಾಗ, ಅನಿಯಮಿತ ಕಣಗಳು ದೊಡ್ಡ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಮೇಲ್ಮೈ ವಿಸ್ತೀರ್ಣವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ, ಇದು ಎರಡು ಹಂತಗಳ ಸಂಪೂರ್ಣ ಕ್ರಿಯೆಗೆ ಹೆಚ್ಚು ಅನುಕೂಲಕರವಾಗಿರುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಬೆಲೆ ತುಲನಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ. 2.3 ಕಣಗಳ ಗಾತ್ರ

ಸಣ್ಣ ಕಣದ ಗಾತ್ರ, ಹೆಚ್ಚಿನ ಕಾಲಮ್ ದಕ್ಷತೆ ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿನ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆ, ಆದರೆ ಹೆಚ್ಚಿನ ಒತ್ತಡದ ಪ್ರತಿರೋಧವು ಕೆಟ್ಟದಾಗಿದೆ. ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಳಸುವ ಕಾಲಮ್ 5 μm ಕಣದ ಗಾತ್ರದ ಕಾಲಮ್ ಆಗಿದೆ; ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ಅಗತ್ಯವು ಅಧಿಕವಾಗಿದ್ದರೆ, 1.5-3 μm ಫಿಲ್ಲರ್ ಅನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಬಹುದು, ಇದು ಕೆಲವು ಸಂಕೀರ್ಣ ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್ ಮತ್ತು ಬಹು-ಘಟಕ ಮಾದರಿಗಳ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯ ಸಮಸ್ಯೆಯನ್ನು ಪರಿಹರಿಸಲು ಅನುಕೂಲಕರವಾಗಿದೆ. UPLC 1.5 μm ಫಿಲ್ಲರ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸಬಹುದು; 10 μm ಅಥವಾ ದೊಡ್ಡ ಕಣದ ಗಾತ್ರದ ಫಿಲ್ಲರ್‌ಗಳನ್ನು ಅರೆ-ಸಿದ್ಧತಾ ಅಥವಾ ಪೂರ್ವಸಿದ್ಧತಾ ಕಾಲಮ್‌ಗಳಿಗೆ ಹೆಚ್ಚಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. 2.4 ಇಂಗಾಲದ ವಿಷಯ

ಇಂಗಾಲದ ವಿಷಯವು ಸಿಲಿಕಾ ಜೆಲ್‌ನ ಮೇಲ್ಮೈಯಲ್ಲಿ ಬಂಧಿತ ಹಂತದ ಅನುಪಾತವನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಮೇಲ್ಮೈ ಪ್ರದೇಶ ಮತ್ತು ಬಂಧಿತ ಹಂತದ ವ್ಯಾಪ್ತಿಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದೆ. ಹೆಚ್ಚಿನ ಇಂಗಾಲದ ಅಂಶವು ಹೆಚ್ಚಿನ ಕಾಲಮ್ ಸಾಮರ್ಥ್ಯ ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿನ ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ಅನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿನ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯ ಅಗತ್ಯವಿರುವ ಸಂಕೀರ್ಣ ಮಾದರಿಗಳಿಗೆ ಹೆಚ್ಚಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಎರಡು ಹಂತಗಳ ನಡುವಿನ ದೀರ್ಘ ಸಂವಾದದ ಸಮಯದಿಂದಾಗಿ, ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ಸಮಯವು ದೀರ್ಘವಾಗಿರುತ್ತದೆ; ಕಡಿಮೆ ಇಂಗಾಲದ ವಿಷಯದ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೊಗ್ರಾಫಿಕ್ ಕಾಲಮ್‌ಗಳು ಕಡಿಮೆ ವಿಶ್ಲೇಷಣಾ ಸಮಯವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ವಿಭಿನ್ನ ಆಯ್ಕೆಗಳನ್ನು ತೋರಿಸಬಹುದು, ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿನ ಜಲೀಯ ಹಂತದ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳ ಅಗತ್ಯವಿರುವ ತ್ವರಿತ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ಮತ್ತು ಮಾದರಿಗಳ ಅಗತ್ಯವಿರುವ ಸರಳ ಮಾದರಿಗಳಿಗೆ ಹೆಚ್ಚಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ, C18 ನ ಇಂಗಾಲದ ಅಂಶವು 7% ರಿಂದ 19% ವರೆಗೆ ಇರುತ್ತದೆ. 2.5 ರಂಧ್ರದ ಗಾತ್ರ ಮತ್ತು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಮೇಲ್ಮೈ ಪ್ರದೇಶ

HPLC ಹೊರಹೀರುವಿಕೆ ಮಾಧ್ಯಮವು ಸರಂಧ್ರ ಕಣಗಳಾಗಿವೆ, ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿನ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಗಳು ರಂಧ್ರಗಳಲ್ಲಿ ನಡೆಯುತ್ತವೆ. ಆದ್ದರಿಂದ, ಅಣುಗಳು ಹೀರಿಕೊಳ್ಳಲು ಮತ್ತು ಬೇರ್ಪಡಿಸಲು ರಂಧ್ರಗಳನ್ನು ಪ್ರವೇಶಿಸಬೇಕು.

ರಂಧ್ರದ ಗಾತ್ರ ಮತ್ತು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಮೇಲ್ಮೈ ವಿಸ್ತೀರ್ಣವು ಎರಡು ಪೂರಕ ಪರಿಕಲ್ಪನೆಗಳು. ಸಣ್ಣ ರಂಧ್ರದ ಗಾತ್ರ ಎಂದರೆ ದೊಡ್ಡ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಮೇಲ್ಮೈ ಪ್ರದೇಶ, ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಯಾಗಿ. ಒಂದು ದೊಡ್ಡ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಮೇಲ್ಮೈ ಪ್ರದೇಶವು ಮಾದರಿ ಅಣುಗಳು ಮತ್ತು ಬಂಧಿತ ಹಂತಗಳ ನಡುವಿನ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ, ಧಾರಣವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ, ಮಾದರಿ ಲೋಡಿಂಗ್ ಮತ್ತು ಕಾಲಮ್ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಸಂಕೀರ್ಣ ಘಟಕಗಳ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ. ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಸರಂಧ್ರ ಭರ್ತಿಸಾಮಾಗ್ರಿಗಳು ಈ ರೀತಿಯ ಭರ್ತಿಸಾಮಾಗ್ರಿಗಳಿಗೆ ಸೇರಿವೆ. ಹೆಚ್ಚಿನ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯ ಅವಶ್ಯಕತೆಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವವರಿಗೆ, ದೊಡ್ಡ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಮೇಲ್ಮೈ ವಿಸ್ತೀರ್ಣದೊಂದಿಗೆ ಫಿಲ್ಲರ್ಗಳನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಲು ಸೂಚಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ; ಸಣ್ಣ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಮೇಲ್ಮೈ ವಿಸ್ತೀರ್ಣವು ಹಿಂಭಾಗದ ಒತ್ತಡವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ, ಕಾಲಮ್ ದಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಸಮತೋಲನ ಸಮಯವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ, ಇದು ಗ್ರೇಡಿಯಂಟ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ. ಕೋರ್-ಶೆಲ್ ಫಿಲ್ಲರ್‌ಗಳು ಈ ರೀತಿಯ ಫಿಲ್ಲರ್‌ಗಳಿಗೆ ಸೇರಿವೆ. ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯನ್ನು ಖಾತ್ರಿಪಡಿಸುವ ಪ್ರಮೇಯದಲ್ಲಿ, ಹೆಚ್ಚಿನ ವಿಶ್ಲೇಷಣಾ ದಕ್ಷತೆಯ ಅವಶ್ಯಕತೆಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವವರಿಗೆ ಸಣ್ಣ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಮೇಲ್ಮೈ ವಿಸ್ತೀರ್ಣದೊಂದಿಗೆ ಫಿಲ್ಲರ್ಗಳನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಲು ಸೂಚಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. 2.6 ರಂಧ್ರದ ಪರಿಮಾಣ ಮತ್ತು ಯಾಂತ್ರಿಕ ಶಕ್ತಿ

ಪೋರ್ ವಾಲ್ಯೂಮ್ ಅನ್ನು "ಪೋರ್ ವಾಲ್ಯೂಮ್" ಎಂದೂ ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ಪ್ರತಿ ಘಟಕದ ಕಣದ ಶೂನ್ಯ ಪರಿಮಾಣದ ಗಾತ್ರವನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಇದು ಫಿಲ್ಲರ್ನ ಯಾಂತ್ರಿಕ ಶಕ್ತಿಯನ್ನು ಚೆನ್ನಾಗಿ ಪ್ರತಿಬಿಂಬಿಸುತ್ತದೆ. ದೊಡ್ಡ ರಂಧ್ರದ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಫಿಲ್ಲರ್‌ಗಳ ಯಾಂತ್ರಿಕ ಶಕ್ತಿಯು ಸಣ್ಣ ರಂಧ್ರದ ಪರಿಮಾಣದೊಂದಿಗೆ ಫಿಲ್ಲರ್‌ಗಳಿಗಿಂತ ಸ್ವಲ್ಪ ದುರ್ಬಲವಾಗಿರುತ್ತದೆ. 1.5 mL/g ಗಿಂತ ಕಡಿಮೆ ಅಥವಾ ಸಮಾನವಾದ ರಂಧ್ರದ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಫಿಲ್ಲರ್‌ಗಳನ್ನು ಹೆಚ್ಚಾಗಿ HPLC ಬೇರ್ಪಡಿಕೆಗಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಆದರೆ 1.5 mL/g ಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿನ ರಂಧ್ರದ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಫಿಲ್ಲರ್‌ಗಳನ್ನು ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಆಣ್ವಿಕ ಹೊರಗಿಡುವ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಮತ್ತು ಕಡಿಮೆ-ಒತ್ತಡದ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿಗೆ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. 2.7 ಕ್ಯಾಪಿಂಗ್ ದರ

ಕ್ಯಾಪಿಂಗ್ ಸಂಯುಕ್ತಗಳು ಮತ್ತು ಬಹಿರಂಗ ಸಿಲಾನಾಲ್ ಗುಂಪುಗಳ ನಡುವಿನ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಯಿಂದ ಉಂಟಾಗುವ ಟೈಲಿಂಗ್ ಶಿಖರಗಳನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ (ಉದಾಹರಣೆಗೆ ಕ್ಷಾರೀಯ ಸಂಯುಕ್ತಗಳು ಮತ್ತು ಸಿಲಾನಾಲ್ ಗುಂಪುಗಳ ನಡುವಿನ ಅಯಾನಿಕ್ ಬಂಧ, ವ್ಯಾನ್ ಡೆರ್ ವಾಲ್ಸ್ ಪಡೆಗಳು ಮತ್ತು ಆಮ್ಲೀಯ ಸಂಯುಕ್ತಗಳು ಮತ್ತು ಸಿಲಾನಾಲ್ ಗುಂಪುಗಳ ನಡುವಿನ ಹೈಡ್ರೋಜನ್ ಬಂಧಗಳು), ಇದರಿಂದಾಗಿ ಕಾಲಮ್ ದಕ್ಷತೆ ಮತ್ತು ಗರಿಷ್ಠ ಆಕಾರವನ್ನು ಸುಧಾರಿಸುತ್ತದೆ. . ಮುಚ್ಚದ ಬಂಧಿತ ಹಂತಗಳು ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಧ್ರುವ ಮಾದರಿಗಳಿಗೆ, ಕ್ಯಾಪ್ಡ್ ಬಾಂಡೆಡ್ ಹಂತಗಳಿಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದಂತೆ ವಿಭಿನ್ನ ಆಯ್ಕೆಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುತ್ತವೆ.

1. ವಿವಿಧ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಕಾಲಮ್‌ಗಳ ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್ ವ್ಯಾಪ್ತಿ

ಈ ಅಧ್ಯಾಯವು ಕೆಲವು ಸಂದರ್ಭಗಳಲ್ಲಿ ವಿವಿಧ ರೀತಿಯ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಕಾಲಮ್‌ಗಳ ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್ ವ್ಯಾಪ್ತಿಯನ್ನು ವಿವರಿಸುತ್ತದೆ.

3.1 ರಿವರ್ಸ್ಡ್-ಫೇಸ್ C18 ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ಕಾಲಮ್

C18 ಕಾಲಮ್ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಳಸುವ ರಿವರ್ಸ್ಡ್-ಫೇಸ್ ಕಾಲಮ್ ಆಗಿದೆ, ಇದು ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಾವಯವ ಪದಾರ್ಥಗಳ ವಿಷಯ ಮತ್ತು ಅಶುದ್ಧತೆಯ ಪರೀಕ್ಷೆಗಳನ್ನು ಪೂರೈಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಮಧ್ಯಮ-ಧ್ರುವೀಯ, ದುರ್ಬಲ ಧ್ರುವೀಯ ಮತ್ತು ಧ್ರುವೀಯವಲ್ಲದ ವಸ್ತುಗಳಿಗೆ ಅನ್ವಯಿಸುತ್ತದೆ. ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯ ಅವಶ್ಯಕತೆಗಳಿಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ C18 ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ಕಾಲಮ್‌ನ ಪ್ರಕಾರ ಮತ್ತು ವಿವರಣೆಯನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಬೇಕು. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಹೆಚ್ಚಿನ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ಅಗತ್ಯತೆಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ವಸ್ತುಗಳಿಗೆ, 5 μm*4.6 mm*250 mm ವಿಶೇಷಣಗಳನ್ನು ಹೆಚ್ಚಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ; ಸಂಕೀರ್ಣ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್ ಮತ್ತು ಅಂತಹುದೇ ಧ್ರುವೀಯತೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ವಸ್ತುಗಳಿಗೆ, 4 μm*4.6 mm*250 mm ವಿಶೇಷಣಗಳು ಅಥವಾ ಸಣ್ಣ ಕಣದ ಗಾತ್ರಗಳನ್ನು ಬಳಸಬಹುದು. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಸೆಲೆಕಾಕ್ಸಿಬ್ API ನಲ್ಲಿ ಎರಡು ಜಿನೋಟಾಕ್ಸಿಕ್ ಕಲ್ಮಶಗಳನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಲೇಖಕರು 3 μm*4.6 mm*250 mm ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿದ್ದಾರೆ. ಎರಡು ಪದಾರ್ಥಗಳ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯು 2.9 ಅನ್ನು ತಲುಪಬಹುದು, ಇದು ಅತ್ಯುತ್ತಮವಾಗಿದೆ. ಹೆಚ್ಚುವರಿಯಾಗಿ, ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯನ್ನು ಖಾತ್ರಿಪಡಿಸುವ ಪ್ರಮೇಯದಲ್ಲಿ, ಕ್ಷಿಪ್ರ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ಅಗತ್ಯವಿದ್ದರೆ, 10 ಎಂಎಂ ಅಥವಾ 15 ಎಂಎಂನ ಸಣ್ಣ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಹೆಚ್ಚಾಗಿ ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಪೈಪೆರಾಕ್ವಿನ್ ಫಾಸ್ಫೇಟ್ API ನಲ್ಲಿ ಜಿನೋಟಾಕ್ಸಿಕ್ ಅಶುದ್ಧತೆಯನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಲೇಖಕರು LC-MS/MS ಅನ್ನು ಬಳಸಿದಾಗ, 3 μm*2.1 mm*100 mm ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಲಾಯಿತು. ಅಶುದ್ಧತೆ ಮತ್ತು ಮುಖ್ಯ ಘಟಕದ ನಡುವಿನ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯು 2.0 ಆಗಿತ್ತು, ಮತ್ತು ಮಾದರಿಯ ಪತ್ತೆಯನ್ನು 5 ನಿಮಿಷಗಳಲ್ಲಿ ಪೂರ್ಣಗೊಳಿಸಬಹುದು. 3.2 ರಿವರ್ಸ್ಡ್-ಫೇಸ್ ಫಿನೈಲ್ ಕಾಲಮ್

ಫಿನೈಲ್ ಕಾಲಮ್ ಕೂಡ ಒಂದು ರೀತಿಯ ರಿವರ್ಸ್ಡ್-ಫೇಸ್ ಕಾಲಮ್ ಆಗಿದೆ. ಈ ರೀತಿಯ ಕಾಲಮ್ ಆರೊಮ್ಯಾಟಿಕ್ ಸಂಯುಕ್ತಗಳಿಗೆ ಬಲವಾದ ಆಯ್ಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. ಸಾಮಾನ್ಯ C18 ಕಾಲಮ್ನಿಂದ ಅಳೆಯಲಾದ ಆರೊಮ್ಯಾಟಿಕ್ ಸಂಯುಕ್ತಗಳ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯು ದುರ್ಬಲವಾಗಿದ್ದರೆ, ನೀವು ಫೀನೈಲ್ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಬದಲಿಸುವುದನ್ನು ಪರಿಗಣಿಸಬಹುದು. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ನಾನು ಸೆಲೆಕಾಕ್ಸಿಬ್ API ಅನ್ನು ತಯಾರಿಸುವಾಗ, ಅದೇ ತಯಾರಕರ ಫಿನೈಲ್ ಕಾಲಮ್‌ನಿಂದ ಅಳೆಯಲಾದ ಮುಖ್ಯ ಘಟಕ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಮತ್ತು ಅದೇ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ (ಎಲ್ಲಾ 5 μm*4.6 mm*250 mm) C18 ಕಾಲಮ್‌ಗಿಂತ ಸುಮಾರು 7 ಪಟ್ಟು ಹೆಚ್ಚು. 3.3 ಸಾಮಾನ್ಯ ಹಂತದ ಕಾಲಮ್

ಹಿಮ್ಮುಖ-ಹಂತದ ಕಾಲಮ್‌ಗೆ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿ ಪೂರಕವಾಗಿ, ಸಾಮಾನ್ಯ-ಹಂತದ ಕಾಲಮ್ ಹೆಚ್ಚು ಧ್ರುವೀಯ ಸಂಯುಕ್ತಗಳಿಗೆ ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ. ರಿವರ್ಸ್ಡ್-ಫೇಸ್ ಕಾಲಮ್‌ನಲ್ಲಿ 90% ಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ಜಲೀಯ ಹಂತವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವಾಗ ಶಿಖರವು ಇನ್ನೂ ತುಂಬಾ ವೇಗವಾಗಿದ್ದರೆ ಮತ್ತು ದ್ರಾವಕ ಶಿಖರಕ್ಕೆ ಹತ್ತಿರದಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ಅತಿಕ್ರಮಿಸಿದರೆ, ನೀವು ಸಾಮಾನ್ಯ-ಹಂತದ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸುವುದನ್ನು ಪರಿಗಣಿಸಬಹುದು. ಈ ರೀತಿಯ ಕಾಲಮ್ ಹಿಲಿಕ್ ಕಾಲಮ್, ಅಮಿನೋ ಕಾಲಮ್, ಸೈನೋ ಕಾಲಮ್ ಇತ್ಯಾದಿಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ.

3.3.1 ಹಿಲಿಕ್ ಕಾಲಮ್ ಹಿಲಿಕ್ ಕಾಲಮ್ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಧ್ರುವೀಯ ವಸ್ತುಗಳಿಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಲು ಬಂಧಿತ ಆಲ್ಕೈಲ್ ಸರಪಳಿಯಲ್ಲಿ ಹೈಡ್ರೋಫಿಲಿಕ್ ಗುಂಪುಗಳನ್ನು ಎಂಬೆಡ್ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಸಕ್ಕರೆ ಪದಾರ್ಥಗಳ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಈ ರೀತಿಯ ಕಾಲಮ್ ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ. ಕ್ಸೈಲೋಸ್ ಮತ್ತು ಅದರ ಉತ್ಪನ್ನಗಳ ವಿಷಯ ಮತ್ತು ಸಂಬಂಧಿತ ಪದಾರ್ಥಗಳನ್ನು ಮಾಡುವಾಗ ಲೇಖಕರು ಈ ರೀತಿಯ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿದ್ದಾರೆ. ಕ್ಸೈಲೋಸ್ ಉತ್ಪನ್ನದ ಐಸೋಮರ್‌ಗಳನ್ನು ಸಹ ಚೆನ್ನಾಗಿ ಬೇರ್ಪಡಿಸಬಹುದು;

3.3.2 ಅಮಿನೊ ಕಾಲಮ್ ಮತ್ತು ಸೈನೊ ಕಾಲಮ್ ಅಮಿನೊ ಕಾಲಮ್ ಮತ್ತು ಸೈನೊ ಕಾಲಮ್ ವಿಶೇಷ ವಸ್ತುಗಳ ಆಯ್ಕೆಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸಲು ಕ್ರಮವಾಗಿ ಬಂಧಿತ ಆಲ್ಕೈಲ್ ಸರಪಳಿಯ ಕೊನೆಯಲ್ಲಿ ಅಮೈನೊ ಮತ್ತು ಸೈನೊ ಮಾರ್ಪಾಡುಗಳ ಪರಿಚಯವನ್ನು ಉಲ್ಲೇಖಿಸುತ್ತದೆ: ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಅಮೈನೊ ಕಾಲಮ್ ಉತ್ತಮ ಆಯ್ಕೆಯಾಗಿದೆ. ಸಕ್ಕರೆಗಳು, ಅಮೈನೋ ಆಮ್ಲಗಳು, ಬೇಸ್ಗಳು ಮತ್ತು ಅಮೈಡ್ಗಳ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆಗಾಗಿ; ಸಂಯೋಜಿತ ಬಂಧಗಳ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಿಂದಾಗಿ ಹೈಡ್ರೋಜನೀಕರಿಸಿದ ಮತ್ತು ಹೈಡ್ರೋಜನೀಕರಿಸದ ರಚನಾತ್ಮಕ ರೀತಿಯ ವಸ್ತುಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸುವಾಗ ಸೈನೋ ಕಾಲಮ್ ಉತ್ತಮ ಆಯ್ಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. ಅಮಿನೊ ಕಾಲಮ್ ಮತ್ತು ಸೈನೊ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಸಾಮಾನ್ಯ ಹಂತದ ಕಾಲಮ್ ಮತ್ತು ರಿವರ್ಸ್ ಫೇಸ್ ಕಾಲಮ್ ನಡುವೆ ಬದಲಾಯಿಸಬಹುದು, ಆದರೆ ಆಗಾಗ್ಗೆ ಬದಲಾಯಿಸುವುದನ್ನು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡುವುದಿಲ್ಲ. 3.4 ಚಿರಲ್ ಕಾಲಮ್

ಚಿರಲ್ ಕಾಲಮ್, ಹೆಸರೇ ಸೂಚಿಸುವಂತೆ, ಚಿರಲ್ ಸಂಯುಕ್ತಗಳ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆ ಮತ್ತು ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ, ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಔಷಧೀಯ ಕ್ಷೇತ್ರದಲ್ಲಿ. ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಹಿಮ್ಮುಖ ಹಂತ ಮತ್ತು ಸಾಮಾನ್ಯ ಹಂತದ ಕಾಲಮ್‌ಗಳು ಐಸೋಮರ್‌ಗಳ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯನ್ನು ಸಾಧಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗದಿದ್ದಾಗ ಈ ರೀತಿಯ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಪರಿಗಣಿಸಬಹುದು. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಲೇಖಕರು 5 μm*4.6 mm*250 mm ಚಿರಲ್ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು 1,2-ಡೈಫೆನೈಲೆಥಿಲೆನೆಡಿಯಮೈನ್‌ನ ಎರಡು ಐಸೋಮರ್‌ಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲು ಬಳಸಿದ್ದಾರೆ: (1S, 2S)-1, 2-ಡಿಫೆನೈಲೆಥಿಲೆನೆಡಿಯಮೈನ್ ಮತ್ತು (1R, 2R)-1, 2 -ಡಿಫೆನೈಲೆಥಿಲೆನ್ಡಿಯಮೈನ್, ಮತ್ತು ಎರಡರ ನಡುವಿನ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ಸುಮಾರು 2.0 ತಲುಪಿತು. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಚಿರಲ್ ಕಾಲಮ್‌ಗಳು ಇತರ ವಿಧದ ಕಾಲಮ್‌ಗಳಿಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ದುಬಾರಿಯಾಗಿದೆ, ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ 1W+/ಪೀಸ್. ಅಂತಹ ಕಾಲಮ್ಗಳ ಅಗತ್ಯವಿದ್ದರೆ, ಘಟಕವು ಸಾಕಷ್ಟು ಬಜೆಟ್ ಅನ್ನು ಮಾಡಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ. 3.5 ಅಯಾನ್ ವಿನಿಮಯ ಕಾಲಮ್

ಅಯಾನುಗಳು, ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು, ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲಗಳು ಮತ್ತು ಕೆಲವು ಸಕ್ಕರೆ ಪದಾರ್ಥಗಳಂತಹ ಚಾರ್ಜ್ಡ್ ಅಯಾನುಗಳ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆ ಮತ್ತು ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಅಯಾನು ವಿನಿಮಯ ಕಾಲಮ್ಗಳು ಸೂಕ್ತವಾಗಿವೆ. ಫಿಲ್ಲರ್ ಪ್ರಕಾರದ ಪ್ರಕಾರ, ಅವುಗಳನ್ನು ಕ್ಯಾಷನ್ ಎಕ್ಸ್ಚೇಂಜ್ ಕಾಲಮ್ಗಳು, ಅಯಾನ್ ಎಕ್ಸ್ಚೇಂಜ್ ಕಾಲಮ್ಗಳು ಮತ್ತು ಬಲವಾದ ಕ್ಯಾಷನ್ ಎಕ್ಸ್ಚೇಂಜ್ ಕಾಲಮ್ಗಳಾಗಿ ವಿಂಗಡಿಸಲಾಗಿದೆ.

ಕ್ಯಾಷನ್ ವಿನಿಮಯ ಕಾಲಮ್‌ಗಳು ಕ್ಯಾಲ್ಸಿಯಂ-ಆಧಾರಿತ ಮತ್ತು ಹೈಡ್ರೋಜನ್-ಆಧಾರಿತ ಕಾಲಮ್‌ಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿವೆ, ಇದು ಅಮೈನೋ ಆಮ್ಲಗಳಂತಹ ಕ್ಯಾಟಯಾನಿಕ್ ಪದಾರ್ಥಗಳ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಕ್ಯಾಲ್ಸಿಯಂ ಗ್ಲುಕೋನೇಟ್ ಮತ್ತು ಕ್ಯಾಲ್ಸಿಯಂ ಅಸಿಟೇಟ್ ಅನ್ನು ಫ್ಲಶಿಂಗ್ ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸುವಾಗ ಲೇಖಕರು ಕ್ಯಾಲ್ಸಿಯಂ ಆಧಾರಿತ ಕಾಲಮ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸಿದ್ದಾರೆ. ಎರಡೂ ಪದಾರ್ಥಗಳು λ=210nm ನಲ್ಲಿ ಬಲವಾದ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದ್ದವು, ಮತ್ತು ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯ ಪದವಿ 3.0 ತಲುಪಿತು; ಗ್ಲೂಕೋಸ್-ಸಂಬಂಧಿತ ವಸ್ತುಗಳನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸುವಾಗ ಲೇಖಕರು ಹೈಡ್ರೋಜನ್-ಆಧಾರಿತ ಕಾಲಮ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸಿದ್ದಾರೆ. ಹಲವಾರು ಪ್ರಮುಖ ಸಂಬಂಧಿತ ಪದಾರ್ಥಗಳು - ಮಾಲ್ಟೋಸ್, ಮಾಲ್ಟೋಟ್ರಿಯೋಸ್ ಮತ್ತು ಫ್ರಕ್ಟೋಸ್ - ಡಿಫರೆನ್ಷಿಯಲ್ ಡಿಟೆಕ್ಟರ್‌ಗಳ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಂವೇದನೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದ್ದು, ಪತ್ತೆ ಮಿತಿಯು 0.5 ppm ಗಿಂತ ಕಡಿಮೆ ಮತ್ತು 2.0-2.5 ರ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯ ಮಟ್ಟವಾಗಿದೆ.

ಅಯಾನು ವಿನಿಮಯ ಕಾಲಮ್‌ಗಳು ಸಾವಯವ ಆಮ್ಲಗಳು ಮತ್ತು ಹ್ಯಾಲೊಜೆನ್ ಅಯಾನುಗಳಂತಹ ಅಯಾನಿಕ್ ಪದಾರ್ಥಗಳ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಸೂಕ್ತವಾಗಿವೆ; ಬಲವಾದ ಕ್ಯಾಷನ್ ವಿನಿಮಯ ಕಾಲಮ್‌ಗಳು ಹೆಚ್ಚಿನ ಅಯಾನು ವಿನಿಮಯ ಸಾಮರ್ಥ್ಯ ಮತ್ತು ಆಯ್ಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಸಂಕೀರ್ಣ ಮಾದರಿಗಳ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆ ಮತ್ತು ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ.

ಮೇಲಿನವು ಲೇಖಕರ ಸ್ವಂತ ಅನುಭವದೊಂದಿಗೆ ಸಂಯೋಜಿತವಾದ ಹಲವಾರು ಸಾಮಾನ್ಯ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಕಾಲಮ್‌ಗಳ ಪ್ರಕಾರಗಳು ಮತ್ತು ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್ ಶ್ರೇಣಿಗಳ ಪರಿಚಯವಾಗಿದೆ. ದೊಡ್ಡ-ರಂಧ್ರ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೊಗ್ರಾಫಿಕ್ ಕಾಲಮ್‌ಗಳು, ಸಣ್ಣ-ರಂಧ್ರ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ಕಾಲಮ್‌ಗಳು, ಅಫಿನಿಟಿ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ಕಾಲಮ್‌ಗಳು, ಮಲ್ಟಿಮೋಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ಕಾಲಮ್‌ಗಳು, ಅಲ್ಟ್ರಾ-ಹೈ ಪರ್ಫಾರ್ಮೆನ್ಸ್ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಕಾಲಮ್‌ಗಳು (UHPLC), ಸೂಪರ್ ಕ್ರಿಟಿಕಲ್ ಫ್ಲೂಯಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಕಾಲಮ್‌ಗಳಂತಹ ನಿಜವಾದ ಅನ್ವಯಗಳಲ್ಲಿ ಇತರ ವಿಶೇಷ ರೀತಿಯ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೊಗ್ರಾಫಿಕ್ ಕಾಲಮ್‌ಗಳಿವೆ. SFC), ಇತ್ಯಾದಿ. ಅವರು ವಿವಿಧ ಕ್ಷೇತ್ರಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ರಮುಖ ಪಾತ್ರ ವಹಿಸುತ್ತಾರೆ. ಮಾದರಿಯ ರಚನೆ ಮತ್ತು ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳು, ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯ ಅವಶ್ಯಕತೆಗಳು ಮತ್ತು ಇತರ ಉದ್ದೇಶಗಳಿಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ರೀತಿಯ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೊಗ್ರಾಫಿಕ್ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಬೇಕು.